可见分光光度计是一种结构简洁、使用方便的单光束分光光度计,基于样品对单色光的选择吸收特性可用于对样品进行定性和定量分析。
其定量分析根据相对测量原理工作,即选定样品的溶剂(或空气 )作为标准试样,设定其透射比为100%,被测样品的透射比则相对于标准试样(或空气)而得到。
当一束单色光照射待测物质的溶液时,当某一定频率(或波长)的可见光所具有的能量(hf)恰好与待测物质分子中的价电子的能级差相适应(即ΔE=E2-E1=hf)时,待测物将对该频率(波长)的可见光产生选择性的吸收。用可见分光光度计可以测量和记录其吸收程度(吸光度)。
由于在一定条件下,吸光度A与待测物质的浓度C及吸收地长度l的乘积成正比,即A= KCL,所以,在测得吸光度 A后,可采用标准曲线法、比较法以及标准加入法等方法进行定量分析。
下面让我们一起来了解一下可见分光光度计的使用方法吧
(1)开机预热
仪器接通电源,微机进行系统自检,LCD显示窗口显示相应的产品型号后,仪器进入工作状态。默认的工作模式是T 。
注意:为使内部达到热平衡,开机预热时间不小于30 分钟。
(2)改变波长
通过旋转波长手轮改变波长,并在波长观察窗的刻度选择所需的波长。
(3)放置参比与待测样品
选择测试用的比色皿,把盛放参比和待测液的样品放入样品架内,通过样品架拉杆来选择样品的位置。当拉杆到位时有定位感,到位时轻轻推拉一下以保证定位的正确。
(4)调0%T、调100%T/0A
为保证仪器进入正确的测试状态,在仪器改变测试波长和测试一段时间后可通过按0%键和100%/0A键对仪器进行调零和调满度、吸光度。
(5)显示方式的选择
a. T 透射比
b. A 吸光度
c. C 浓度
d. F浓度因子